相差顯微鏡的鏡檢原理

    相差顯微鏡，又稱(chēng)相襯顯微鏡，多用于觀察活細(xì)胞或者不染色的組織切片，有時(shí)也可用于觀察缺少反差的染色樣品。它是利用物體不同結(jié)構(gòu)成分之間的折射率和厚度的差別，把通過(guò)物體不同部分的光程差轉(zhuǎn)變?yōu)檎穹ü鈴?qiáng)度）的差別，經(jīng)過(guò)帶有環(huán)狀光闌的聚光鏡和帶有相位片的相差物鏡實(shí)現(xiàn)觀測(cè)的生物顯微鏡。

相差顯微鏡光路圖

    鏡檢時(shí)，光源只能通過(guò)環(huán)狀光闌的透明環(huán)，經(jīng)聚光鏡后，這束光線通過(guò)被檢物體，因各部分的光程不同，光線將發(fā)生不同程度的偏斜（衍射）。由于透明圓環(huán)所成的象恰恰落在物鏡后焦點(diǎn)平面上，并和相板的共軛面重合。因此，未偏斜的直射光便通過(guò)共軛面，而發(fā)生偏斜的衍射光則由補(bǔ)償面通過(guò)。由于相板的共軛面與補(bǔ)償面的性質(zhì)不同，它們分別將通過(guò)這兩部分的光線產(chǎn)生一定的相位差和強(qiáng)度的減弱，這樣兩組光線再經(jīng)后透鏡的會(huì)聚，又復(fù)在同一光路上行進(jìn)，而使直射光和衍射光產(chǎn)生光的干涉，變相位差為振幅差。干涉的結(jié)果，有的是振幅的同向量，合成波增大，即相長(zhǎng)干涉，此部分便明亮；有的是振幅的異向量，合成波減少，即相消干涉，則此部分便暗淡。這樣在相襯鏡檢時(shí)，通過(guò)無(wú)色透明物體的光線，使人眼不可分辨的相位差轉(zhuǎn)變?yōu)槿搜劭煞直娴恼穹睢?/span>